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    PCR 產物純化

    發布時間: 2023-04-21  點擊次數: 419次

    材料與儀器

    TE 或去離子水 PCR 產物
    離心機和轉子 PCR 濾 件 微量離心管

    步驟

    一、材料

    1. 緩沖液和溶液

    TE(lOmmol/L Tris-HCl,lmmol/L EDTA,pH7.5) 或去離子水

    2. 核酸和寡核苷酸

    待測序的 PCR 產物

    3. 離心機和轉子

    帶有固定傾角轉子的小型離心機,如 Eppemlorf5415C

    4. 特殊設備

    AmiconMicrocon-PCR 濾件(Millipore) 或者相當的產品,微董離心管或接收管

    二、方法

    1. 對每一個待純化的 PCR 產物,都在接收管中放置一個濾件,濾件的儲液面向上

    儲液池中加入 400ul 去離子水或 TE,注意加樣時不要觸及膜。加入 100ulPCR 產物,避免帶進礦物油。如果 PCR 產物不足 100ul, 用去離子水或 TE 補足,蓋上蓋子。

    2. 將 1 中所得組合體用帶有固定傾角轉子的離心機,l000 g 離心 15 min(例如,Eppendorf5415C 離心機上 3300r/min)。注意蓋子和管的結合部朝向轉子的中央。

    3. 移去濾件,將其放入一干凈的收集管中,有膜面朝上(如果愿意,濾件可以一直

    存到樣品分析結束)。在濾件上小心地加 20ul 去離子水或 TE,注意不要觸及膜,然后將濾件反轉過來,放回到干凈的收集管中,使帶有液體的一面朝下。

    4.1000 g 離心 2 min, 收集純化的片段。


    深圳安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術實力、壹流的經營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業??偛吭O在廣東,服務面向全國。安培生物集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發為一體的專業化高科技公司,旨在為生命科學的發展提供壹流的產品與服務。本公司建立了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、信號傳導和神經科學等領域的產品供應線,在各個領域內向用戶提供世界前沿水平和質量穩定的產品,安培生物致力于為廣大的科研機構、高等院校等優質客戶提供優質的產品、技術支持與服務。


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